Научный журнал
Международный журнал экспериментального образования

ISSN 2618–7159
ИФ РИНЦ = 0,431

ВЛИЯНИЕ ОКСИДА АЗОТА НА СОСТОЯНИЕ ГЕМОГЛОБИНА ЭРИТРОЦИТОВ В УСЛОВИЯХ ЛАКТОАЦИДОЗА

Морозова А.А. 1 Кузьмичева Л.В. 1 Новожилова О.С. 1 Громова Н.В. 1 Ревина Э.С. 1 Тайрова М.Р. 1 Грунюшкин И.П. 1
1 ФГБОУ ВПО «Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева»

Благодаря активному изучению функций лактата в организме в настоящее время появились сведения о его значимости в энергетическом обмене, репарации тканей, активности ферментов. Наиболее важную роль в организме лактат играет как координатор клеточного метаболизма эритроцитов, поскольку именно гликолиз обеспечивает сохранение структуры и функции гемоглобина, целостность мембраны и образование и энергии для ионных насосов. Гликолиз и пентозофосфатный путь в эритроцитах являются поставщиками НАДН и НАДФН, которые восстанавливают метгемоглобин. То есть, окисление глюкозы в эритроците имеет 2 функции: энергетическую и антиоксидантную, нарушение которых приводит к гемолизу.

Не менее важную роль в организме выполняет оксид азота (NO), имеющий отношение почти ко всем метаболическим и физиологическим процессам. Однако, особый интерес представляет его способность влиять на активность многих белков и ферментов – компонентов дыхательной цепи митохондрий и гликолиза.

В работе была использована лактатная модель гипоксического состояния (Boning D. еt. аl., 1989) в сочетании с действием нитрита натрия, путем инкубации фракции чистых эритроцитов в среде Рингера-Локка (1:1) при 37°С в течение 30 мин с добавлением молочной кислоты в концентрации 7,5 мМ/л и нитрита натрия – 2 мМ/л. Исследование выполнено на рамановском спектрометре in via Basis фирмы Renishaw с короткофокусным высокосветосильным монохроматором (фокусное расстояние не более 250 мм). Для возбуждения рамановских спектров использовался лазер (длина волны излучения 532 нм, мощность излучения 100 мВт, объектив 100х). Оцифрованные спектры обработаны в программе WIRE 3.3. Произведена коррекция базовой линии, сглаживание спектров. Для анализа конформации и О2-связывающих свойств гемоглобина (Гб) использовали следующие полосы КР спектров эритроцитов (указаны положения максимумов): 1172, 1355, 1375, 1548-1552, 1580-1588, 1618, 1668 см-1. Спектроскопия комбинационного рассеяния (КР) позволяет исследовать состояние атома железа и лигандов, связанные с ним, по изменению структуры тетрапиррольного цикла гемопорфирина гемоглобина. Содержание МДА в эритроцитах определяли по Конюховой С.Г. В гемолизате, после центрифугирования эритроцитарной взвеси, спектрофотометрически измеряли экстинкции на волновых пиках гемоглобина (430 и 555 нм), оксигемоглобина (536 и 572 нм) и метгемоглобина (630 нм).

Как показали наши исследования при умеренном ацидозе (7,5 ммоль/л молочной кислоты) наблюдается снижение колебаний пиррольных колец гемопорфирина гемоглобина эритроцитов. При этом относительное количество оксигемоглобина, способного связывать и выделять лиганды, а также сродство гемоглобина к кислороду практически не изменяется. Наблюдается оксидативный стресс на мембране эритроцита, который проявляется в увеличении концентрации продуктов ПОЛ.

При одновременном действии нитрита натрия и молочной кислоты наблюдается увеличение способности гемоглобина выделять лиганды на 4,7 % по отношению к контролю. При этом снижается содержание комплексов гемоглобина с NO при отсутствии связи между атомом Fe2+ и глобином (I) на 9,7 %, а содержание комплексов гемоглобина с NO при наличии связи между атомом Fe2+ и глобином (II) остается в пределах контрольных значений. Сродство гемоглобина к кислороду, относительное количество оксигемоглобина и способность гемоглобина связывать лиганды остаются в пределах контрольных значений. В мембране эритроцита наблюдается усиление перекисного окисления липидов, выявляемое по МДА, в 1,96 раза. В эритроцитарной взвеси наблюдается увеличение содержания метгемоглобина на 24 % по отношению к контрольной группе.

Таким образом, сочетанное действие молочной кислоты и нитрита натрия на эритроциты in vitro вызывает окислительный стресс на мембране эритроцита, что приводит к повышению образования метгемоглобина и снижению содержания комплексов гемоглобина (I), однако, содержание комплексов гемоглобина (II) остается в пределах нормы.


Библиографическая ссылка

Морозова А.А., Кузьмичева Л.В., Новожилова О.С., Громова Н.В., Ревина Э.С., Тайрова М.Р., Грунюшкин И.П. ВЛИЯНИЕ ОКСИДА АЗОТА НА СОСТОЯНИЕ ГЕМОГЛОБИНА ЭРИТРОЦИТОВ В УСЛОВИЯХ ЛАКТОАЦИДОЗА // Международный журнал экспериментального образования. – 2014. – № 12. – С. 70-71;
URL: http://www.expeducation.ru/ru/article/view?id=6298 (дата обращения: 19.11.2019).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074